کاربرد دستگاه HPLC|دستگاه HPLC WATERS|دستگاه HPLC AGILENT

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا یا کروماتوگرافی مایع با فشار بالا (HPLC) یک روش کروماتوگرافی است که برای جداسازی مخلوطی از ترکیبات در شیمی تجزیه و بیوشیمی به منظور شناسایی، تعیین کمیت یا خالص سازی اجزای جداگانه مخلوط استفاده می شود.

HPLC فاز معکوس یا کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا (UHPLC) یک حالت جداسازی متداول است. حفظ دینامیکی ترکیبات دارای عملکرد آبگریز و آلی را فراهم می کند. ترکیبی از برهمکنش‌های آبگریز و نوع واندروالسی بین تمام ترکیب هدف و هر دو فاز ثابت و متحرک، حفظ این ترکیبات را با فاز معکوس امکان‌پذیر می‌سازد.

HPLC چگونه کار می کند؟

در مقادیر بسیار کم، مخلوط نمونه ای که قرار است جدا شود و آزمایش شود، از طریق یک ستون به جریان فاز متحرک نفوذ می کند. انواع مختلفی از ستون ها با جاذب هایی با اندازه و سطوح مختلف ذرات موجود است.

مخلوط با سرعت های مختلف در ستون حرکت می کند و با جاذب که به عنوان فاز ساکن نیز شناخته می شود، برهم کنش می کند. سرعت هر جزء در مخلوط به 1) ماهیت شیمیایی آن، 2) ماهیت ستون و 3) ترکیب فاز متحرک بستگی دارد. زمانی که یک آنالیت خاص از ستون خارج می شود، زمان ماندگاری آن نامیده می شود. زمان ماند تحت شرایط خاص اندازه گیری می شود و به عنوان مشخصه شناسایی یک آنالیت معین در نظر گرفته می شود.

ذرات جاذب ممکن است ماهیت آبگریز یا قطبی داشته باشند. فازهای متحرک که معمولاً مورد استفاده قرار می گیرند شامل هر ترکیب قابل اختلاط آب و حلال های آلی مانند استونیتریل و متانول است. از فازهای متحرک بدون آب نیز می توان استفاده کرد.

جزء آبی فاز متحرک ممکن است حاوی اسیدهایی مانند اسید فرمیک، فسفریک یا تری فلورواستیک یا نمک باشد تا امکان جداسازی اجزای نمونه را فراهم کند. ترکیب فاز متحرک یا به عنوان یک ثابت یا به عنوان متغیر در طول تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی حفظ می شود. رویکرد ثابت برای جداسازی اجزای نمونه که از نظر میل ترکیبی با فاز ساکن چندان متفاوت نیستند، مؤثر است. در رویکرد متنوع، ترکیب فاز متحرک از قدرت شستشوی کم تا بالا متفاوت است. قدرت شستشوی فاز متحرک با زمان‌های ماند آنالیت منعکس می‌شود که در آن قدرت شستشوی بالا شستشوی سریع ایجاد می‌کند.

ترکیب فاز متحرک بر اساس شدت فعل و انفعالات بین چند جزء نمونه و فاز ساکن انتخاب می شود.

فرآیند پارتیشن بندی HPLC کاملاً شبیه به فرآیند استخراج مایع-مایع است با این تفاوت که اولی یک فرآیند پیوسته است، برخلاف دومی که یک فرآیند گام به گام است. توصیه می شود که فرآیندهای پارتیشن بندی آزمایشی برای تعیین روش دقیق HPLC که جداسازی کافی را فراهم می کند، انجام شود.

تولید کنندگان سیستم های HPLC

امروزه طیف گسترده ای از گزینه های HPLC در بازار وجود دارد. در زیر لیستی از تولیدکنندگان مختلف سیستم HPLC با معرفی مختصری از محصولات آنها آمده است:

• Dionex، یک شرکت مبتنی بر علم کروماتوگرافی، سیستم UltiMate® 3000 Rapid Separation LC، سیستم Ultimate 3000 RSLCnano و خانواده Corona® آشکارسازهای آئروسل باردار جهانی را تولید می کند.
• Jasco Analytical Instruments طیف وسیعی از سیستم های HPLC را ارائه می دهد. سیستم های HPLC سری LC-2000 Plus به طور منحصر به فردی قابل تنظیم هستند. با کارایی بالا و هزینه کم، این سیستم های HPLC می توانند تقریباً با هر نیازی از QA ایزوکراتیک ساده تا توسعه روش پیشرفته چند حلال/چند ستونی سازگار شوند. Isocratic LC-2000plus-Iso دارای پمپ، گاززدا، نمونه برداری خودکار و آشکارساز UV/Vis است. این پمپ با دبی 1 میکرولیتر تا 10 میلی لیتر در دقیقه در فشار تا 500 بار برای استفاده در ستون های ID 2، 3، 4، 6 و تا 10 میلی متر طراحی شده است. Binary Gradient LC-2000plus-HPG مشابه سیستم ایزوکراتیک است اما با پیکربندی پمپ گرادیان دو حلال ارائه شده است. دبی پمپ با ستون های 1 میلی متری سازگار است. گرادیان کواترنری LC-2000plus-LPG نیز مشابه سیستم ایزوکراتیک است. با این حال،
• سیستم HPLC آماده سازی از Gilson دارای محدوده جریان گسترده ای است که می تواند برای جداسازی نیمه آماده سازی و آماده سازی سازگار شود. قدرت پمپاژ بالای آن طیف وسیعی از اندازه ستون های آماده سازی را امکان پذیر می کند. این سیستم با سیستم ایستگاه شستشوی جدید طراحی شده است که شامل جت شستشوی روان است و امکان استفاده از حداکثر دو حلال آبکشی مختلف را فراهم می کند.
• سیستم‌های HPLC شارپ از AAPPTec با پمپ‌هایی ارائه می‌شوند که با ریزپردازنده کنترل می‌شوند، بنابراین نرخ‌های جریان بسیار دقیق و بسیار دقیق را ممکن می‌سازند، که می‌تواند به دستیابی به تکرارپذیری تحلیلی عالی و بالاترین دقت اندازه‌گیری کمک کند.

دیگر تولیدکنندگان در بازار فعلی Waters،Agilent، Beckman Coulter، Bio-Rad و Buck Scientific هستند.

مزایای HPLC

مزایای کلیدی سیستم های HPLC به شرح زیر است:

• ابزار دقیق کروماتوگرافی را کنترل و خودکار می کند
• مدیریت داده ها، ویژگی های امنیتی، و گزارش و اعتبار سنجی ابزار را ارائه می دهد.
• قدرتمند و سازگار
• بهره وری را با مدیریت تمام حوزه های تجزیه و تحلیل - از نمونه تا ابزار، و از جداسازی تا گزارش نتایج افزایش می دهد.
• مقرون به صرفه

کاربردهای HPLC

هدف اصلی تکنیک HPLC شناسایی، تعیین کمیت و خالص سازی یک آنالیت یا ترکیب خاص است. هم تحلیل کمی و هم کیفی قابل انجام است. HPLC ها را می توان در موارد زیر استفاده کرد:

• تصفیه آب
• تشخیص ناخالصی ها در صنایع داروسازی
• پیش تغلیظ اجزای کم مصرف
• کروماتوگرافی تبادل لیگاند
• کروماتوگرافی تبادل یونی پروتئین ها
• کروماتوگرافی تبادل آنیونی با pH بالا کربوهیدرات ها و الیگوساکاریدها

تماس با ما:

جهت دریافت کاتالوگ محصولات و قیمت روز با بخش فروش شرکت ویتا طب تماس حاصل فرمایید